液體除菌過濾的風險管理與驗證

隨著2010版GMP的頒布和進一步實施，無菌藥品生產中“除菌過濾工藝”的風險管理和驗證受到制藥行業的極大關注。除菌過濾器提供商提供的《標準驗證指南》（Validation Guide）為過濾器的驗證提供標準，包括實驗室條件下進行的測試數據和標準值。例如：過濾器耐受滅菌的時間和次數、過濾器耐受的 高溫度和 大壓差、化學兼容性；過濾器溶出物和生物安全性測試，以及該條件下細菌挑戰測試和完整性測試參數等。

3M《標準驗證指南》對過濾器驗證項目做了詳盡描述，通過嚴格驗證確保過濾器應用和性能的一致性和穩定性，做到除菌過濾工藝的零風險。而對于具體藥液中的除菌過濾，溶劑、溫度、壓力、過濾時間等都與實驗室條件不同，則必須按照GMP的要求，進行工藝條件下的“再驗證”。驗證內容包括但不僅限于，藥液對除菌過濾器的影響：化學相容性試驗（Compatibility testing）和完整性試驗（Product-wet integrity test）；除菌過濾器對料液的影響：溶出物試驗 （Extractable testing）和吸附試驗（Adsorption testing）；藥液對除菌過濾器細菌截留率的影響：細菌存活試驗（Bacterial viability testing ）和細菌截留試驗 （Bacterial challenge testing ）。限于篇幅，本文結合理論和實際，重點介紹細菌截留實驗的原理和方法，為細菌截留實驗提供技術參考和理論依據。

除菌過濾工藝

除菌過濾的目的是從原料藥液里通過過濾去除細菌。如果產品無法進行 終滅菌，需要采用0.22mm（更小或相同過濾效力）的除菌過濾器進行除菌過濾。新版GMP附錄1 “第十三章，非 終滅菌產品的過濾”第九十一條規定，與其他滅菌方法相比，除菌過濾的風險 大，因此，宜安裝第二只已滅菌的除菌過濾器再過濾一次藥液。圖一為除菌過濾工藝的工藝流程示意圖，澄清過濾一般采用深層濾芯，去除料液中的不純物質，降低料液濁度和生物負荷度。無菌過濾點采用預過濾與除菌過濾組合的方式確保除菌效率和濾芯過濾性能的穩定性。法規要求的第一個要點是在采用除菌過濾方法時，首先確認采用的過濾器為“除菌級”，達到此要求后，除菌過濾法中的其它無菌保障措施才有意義。定義過濾器是否為除菌級，需要依靠過濾器的微生物截留能力，并完成相關的標準方法驗證和工藝驗證。目前業界缺乏統一標準來衡量孔徑，孔徑的標準對預測微生物截留和比較不同生產商生產的過濾器沒有實際的意義，因而，需要用微生物截留能力來定義除菌級過濾器（2010版-無菌制劑GMP實施指南）。以此可以看出細菌截留試驗對于除菌濾芯驗證的重要性。